檢測靈敏度

定義“超靈敏"
對傳統(tǒng)的ELISAz強(qiáng)烈的要求是具有超靈敏檢測的能力。然而，“超靈敏"一詞經(jīng)常被曲解。其中一個原因是與聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的檢測限(LOD)進(jìn)行了比較。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可以擴(kuò)增核酸，從而檢測出少量的DNA或RNA拷貝數(shù)。例如，實(shí)時PRC的LOD是各種核酸的幾個拷貝數(shù)/檢測。然而，實(shí)時PCR和蛋白質(zhì)檢測系統(tǒng)之間的LOD無法進(jìn)行比較，"超靈敏 "一詞用于蛋白質(zhì)定量是不準(zhǔn)確的。
誤解 "超靈敏 "的第二個原因是源于在其他各種蛋白質(zhì)檢測方法中對LOD的比較。如上所述，許多技術(shù)可以用來量化目標(biāo)蛋白，包括ELISA、LC-MS和芯片實(shí)驗(yàn)室方法。而z低的方法可能被認(rèn)為是'超靈敏'的方法，優(yōu)于其他方法，但這是不合適的，因?yàn)閮H僅根據(jù)檢測限來比較方法，而不考慮對特殊儀器或特殊房間的需求以及成本，是沒有用的。也就是說，"超靈敏 "這個詞并不意味著一個具體的數(shù)值。那么什么是 "超靈敏"？
澳大利亞新南威爾士大學(xué)的J. Justin Gooding最近詳細(xì)討論了這個問題?；瘜W(xué)家和生物學(xué)家對 "超靈敏"一詞的使用是不同的。為了以跨學(xué)科的方式定義該術(shù)語，他將超靈敏生物分析傳感器定義為 "具有足夠靈敏度和低背景的生物傳感器，可以達(dá)到亞皮摩爾檢測極限"。他還解釋說，"這是靈敏度的含義在化學(xué)和生物學(xué)之間的折中，承認(rèn)檢測限的化學(xué)意義與靈敏度之間的聯(lián)系，因?yàn)樗c背景信號有關(guān)"。10-13摩爾/升或更小的檢出限可以被稱為"超靈敏"檢測。如果我們使用96孔微孔板進(jìn)行ELISA，一次測定體積一般等于100μL。因此，10-13摩爾/升相當(dāng)于10-17摩爾/次，這可能很難實(shí)現(xiàn)。