奧瑞達(dá)生物淺談如何區(qū)分雙抗夾心法、間接法和競爭法

近年來，ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用，ELISA試劑盒根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，又分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等幾種類型。

那么，這幾種類型分別應(yīng)用于哪些實(shí)驗(yàn)？這些類型的優(yōu)缺點(diǎn)又是什么呢？請繼續(xù)往下看！

雙抗體夾心法測抗原：雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法，適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

雙抗原夾心法測抗體：反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測定，因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。

間接法：是檢測抗體常用的方法，本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。 

競爭法測抗體：當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合。抗HBe的檢測一般采用此法。 

競爭法測抗原：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，最后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。